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蟾酥對照品成分檢測方法

時(shí)間：2018-01-17   瀏覽次數：  分享到：
蟾酥為蟾蜍科動(dòng)物中華大蟾蜍或黑眶蟾蜍的干燥分泌物。多于夏、秋二季捕捉蟾蜍，洗凈，擠取耳后腺及皮膚腺的白色漿液，加工，干燥。性味辛溫 。歸心經(jīng)。主要功能為解毒、止痛、開(kāi)竅醒神。用于癰疽疔瘡，咽喉腫痛，中暑吐瀉，腹痛神昏，手術(shù)麻醉，以及強心、升壓、興奮呼吸、抗腫瘤等。由于蟾酥具有較強的生理活性，同時(shí)其毒性也較大，因此，對蟾酥及其制劑需要嚴格控制質(zhì)量。
蟾酥對照品
化學(xué)成分及性質(zhì)
蟾酥為蟾蜍耳后腺及皮膚腺分泌的白色漿液，經(jīng)加工干燥而成，化學(xué)成分復雜，主要含蟾蜍甾二烯類(lèi)，強心甾烯蟾毒類(lèi)和吲哚堿類(lèi)。蟾蜍甾二烯類(lèi)又分為游離型和結合型。其游離型稱(chēng)蟾毒配基，其結合型多為脂溶性的蟾酥毒素類(lèi)、蟾酥配基類(lèi)和精氨酸等結合的酯類(lèi)。這類(lèi)成分往往在干燥加工或提取過(guò)程中分解為蟾酥配基類(lèi)。蟾酥中含有脂蟾毒配基、 華蟾毒精、 蟾毒靈、 蟾毒它靈、 遠華蟾毒精及日蟾毒它靈等多種成分。
蟾酥及其制劑的含量測定方法很多，如分光光度法、薄層掃描法、差示光度法、高效液相色譜法和氣相色譜法等。
分光光度法
稱(chēng)取蟾酥適量，置索氏提取器中，加氯仿回流提取 5 小時(shí)，揮干氯仿。殘渣分為二份，一份以乙醇溶解定容；另一份加 4％ NaOH 溶液 2mL，并用乙醇稀釋至刻度，搖勻，室溫下放置 30 分鐘后于 360nm 分別測定兩份溶液的吸收度，計算△ A，由回歸方程計算含量。
取蟾酥約 0.5g，于 80℃干燥 2 小時(shí)，研成細粉，精密稱(chēng)定，加海砂 5g，混勻，置索氏提取器中，加氯仿適量，提取4 小時(shí)，回收氯仿，殘留物加乙醇適量使溶解，濾過(guò)，濾液移至 100mL 量瓶中，用少量乙醇分數次洗滌濾器，洗滌液并入量瓶中并加乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取 lmL置 25mL 量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，在 299nm 波長(cháng)處測定吸收度，按脂蟾毒配基 (C24H3204) 的吸收系數 E ；蘭為 154 計算，即得。
薄層掃描法
薄層掃描法應用較廣，常用硅膠 G 板，丙酮 - 氯仿 -環(huán)己烷展開(kāi)系統，在 λS300nm，λR340nm 處進(jìn)行反射式鋸齒掃描?？蓽y定脂蟾毒配基、華蟾毒精、蟾毒靈、蟾毒它靈、遠華蟾毒精及日蟾毒它靈等多種成分。
氣相色譜法
用氣相色譜法測定蟾酥及其制劑的樣品需進(jìn)行適當的預處理，如將樣品提取液先經(jīng)過(guò)柱層析或薄層層析后，方可進(jìn)行氣相色譜測定，采用 FID 檢測器，內標法或外標法定量。
高效液相色譜法
蟾酥中含有的蟾蜍笛二烯類(lèi)、強心甾烯蟾毒類(lèi)和吲哚堿類(lèi)成分，都具有紫外吸收，可用高效液相色譜法測定。如《中
國藥典》2005 年版蟾酥中華蟾酥毒基和脂蟾毒配基就是用高效液相色譜法測定。
 

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