背景:有關(guān)安石榴甙對破骨細胞形成分化方面的研究很少,對磨損顆粒引起骨吸收類(lèi)疾病影響的研究更少。
目的:建立鈦顆粒誘導的小鼠單核/巨噬細胞株RAW264.7向破骨細胞分化模型,觀(guān)察不同濃度安石榴苷對破骨細胞增殖分化的影響。
方法:將小鼠單核/巨噬細胞株RAW264.7分5組培養,分別加入培養基(空白組)、含0.1g/L鈦顆粒懸液的培養基、含0.1g/L鈦顆粒懸液+25μmol/L安石榴苷的培養基、含0.1g/L鈦顆粒懸液+50μmol/L安石榴苷的培養基、含0.1g/L鈦顆粒懸液+100μmol/L安石榴苷的培養基。CCK-8法檢測培養1,3,5d的細胞增殖活性;培養5d后,抗酒石酸酸性磷酸酶染色檢測成熟破骨細胞數量,Westernblot法檢測IκBα及核轉錄因子κBp65磷酸化水平,RT-PCR測量活化T細胞核因子c1、抗酒石酸酸性磷酸酶和基質(zhì)金屬蛋白酶9mRNA的表達。
結果與結論:與空白組比較,鈦顆粒和不同濃度安石榴苷對RAW264.7細胞的增殖能力均無(wú)影響(P>0.05)。與空白組比較,鈦顆粒組成熟破骨細胞數量、IκBα及核轉錄因子κBp65磷酸化水平、活化T細胞核因子c1mRNA、抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA和基質(zhì)金屬蛋白酶9mRNA表達顯著(zhù)升高(P<0.05,P<0.01),安石榴苷呈濃度依賴(lài)性降低上述指標表達。結果表明安石榴苷可抑制破骨細胞的形成與活化。隨著(zhù)人們對假體松動(dòng)機制認識的深入,藥物預防成為可能。石榴皮是中國傳統的中藥材,距今有100多年的歷史,安石榴苷是石榴皮多酚的主要成分,具有抗氧化、抗癌、抗炎等多種藥理學(xué)功效。Jean-Gilles等通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗證實(shí),安石榴苷能夠抑制基質(zhì)金屬蛋白酶13膠原酶對Ⅱ型膠原蛋白的降解,阻止關(guān)節中軟骨的破壞,防止關(guān)節炎的發(fā)生。安石榴苷在防治骨吸收類(lèi)疾病的研究中剛剛起步,對破骨細胞形態(tài)及功能的調控報道尚少。實(shí)驗旨在探討安石榴苷對鈦顆粒誘導小鼠單核/巨噬細胞株RAW264.7分化為成熟破骨細胞的影響及機制。