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根皮素(CAS60-82-2)對照品提取物提取方法

時(shí)間:2017-11-20   瀏覽次數:  分享到:
1.根皮素(60-82-2)作為多酚的一種.是出色的天然抗氧化劑,可以預防骨質(zhì)硫松、腫瘤疾病、心血管硬化以及老年癡呆癥等戊多種常見(jiàn)疾病,還可降血脂、減肥。無(wú)毒性,可直接加工成膠囊或作為添加劑加人到普通食品中。
有文獻報道了不同溶劑、沮度、時(shí)間、料液比對蘋(píng)果中多酚提取效果的影響閱,但沒(méi)有關(guān)于根皮素提取優(yōu)化的報道。有文獻報道使用乙酸乙醛萃取蘋(píng)果.并利用反相高效液相色語(yǔ)測定含最.但未檢出根皮素。盡管有個(gè)別文獻也測定出根皮素.但提取方法不適合根皮素的提取.反映不出樣品中根皮素的真實(shí)含量。本文利用食用蘋(píng)果的副產(chǎn)品一蘋(píng)果皮.提出一條高提取率的根皮素的提取工藝路線(xiàn)。
根皮素提取物蘋(píng)果
2.1技術(shù)路線(xiàn)
新鮮蘋(píng)果一取蘋(píng)果皮在研缽中碾碎,用70%乙醉水溶液勻漿,浸提法(加熱回流法、做波法、索氏提取法)提取,抽濾一旋轉蒸發(fā),鹽酸沸水浴,乙醚萃取,旋轉蒸發(fā)、正丁醉萃取一旋轉燕發(fā),甲醇溶解,液相色譜測定。
 
2.2色譜條件
利用光電二極管陣列檢測器,可以獲得吸光度
(A )、波長(cháng)(λ)和時(shí)間(t)三維空間色譜圖。在200nm-400nm。波長(cháng)范圍得到根皮素的紫外吸收光譜圖,根皮素的最大吸收波長(cháng)為286nm,并與標準樣品對照,進(jìn)行純度檢驗。
 
2.3蘋(píng)果皮樣品的制取
分別取4份新鮮蘋(píng)果皮25g,在室溫下于研缽中剪碎,加人適量石英沙輔助碾碎。用70%的乙醇水溶液與碾碎的蘋(píng)果皮混合,按2.4方法進(jìn)行根皮素的提取。
根皮素提取
2.4根皮素的粗提
2.4.1浸提法
    取40 mL 70%的乙醉水溶液與碾碎的蘋(píng)果皮混合于IOOmL燒杯中,室溫攪拌1h,溶液開(kāi)始為黃色,提取結束后略顯紅色。提取液減壓抽濾.濾液用流動(dòng)相定容至50 mL,用液相色潛檢側。
2.4.2微波法
    取40 mL 70%的乙醉水溶液與碾碎的蘋(píng)果皮混合于100 mL燒杯中,在微波爐中提取I min,提取液少量蒸發(fā)。提取液顯示為黃色。待其冷卻后減壓抽建,濾液用流動(dòng)相定容至50 mL容盆瓶中,用液相色潛檢測。
2.4.3加熱回流法
取40 mL 70%的乙醉水溶液與碾碎的蘋(píng)果皮混合于100 mL燒杯中,在90℃水浴鍋中回流I h,靜置至室溫?;亓鞣ㄌ崛∫褐苯映闉V困難,先分批在離心機上離心,再減壓抽濾,濾液用流動(dòng)相定容至50 mL,用液相色譜檢測。
2.4.4索氏提取法
取100 mL 70%的乙醉水溶液與碾碎的蘋(píng)果皮混合,在索氏提取儀中提取根皮素2h。旋轉蒸發(fā)儀上燕去部分乙醉,水浴溫度為65℃。靜置至室溫.減壓抽撼,濾液用流動(dòng)相定容至50 mL,用液相色譜檢測。
 
2.5根皮素的精提
    將根皮素的祖提取液轉人旋轉蒸發(fā)儀中,在70℃的水浴上濃縮。在所得漿狀物中,加入8 mL6%鹽酸,溶液呈現紅色。沸水浴上水解3h,溶液逐漸變?yōu)樽虾谏?,并出現沉淀。冷卻后.用50 mL乙醚萃取,上層乙醚萃取液呈現黃色,下層溶液為紫黑色并含有沉淀,靜置10min。
    將乙醚萃取液轉人旋轉蒸發(fā)儀,30℃水浴上蒸去乙醚。殘留物用10 mL蒸餾水溶解,用50 mL正丁醉充分萃取。上層正丁醉萃取液為黃色,下層水層呈現白色乳濁液,有小塊片狀透明不溶物吸附在分液漏斗壁上。
    將正丁醇萃取液轉人旋轉蒸發(fā)儀.70℃的水浴上蒸發(fā),待提取液蒸發(fā)至殘留10 mL左右時(shí).將其例在蒸發(fā)皿上,70℃水浴上蒸去剩余的正丁醇。
2.6根皮素精提取液的檢測
    在表面皿上滴3 mL去離子水、2 mL甲醉,使其溶解并移人離心管中.在離心機中以3 000 r/min離心3 min,清液用流動(dòng)相定容至5 mL.用液相色譜檢測根皮素含量。

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